食品安全標(biāo)準(zhǔn)中銅綠假單胞菌解讀

發(fā)布時(shí)間： 2024-04-30　　點(diǎn)擊次數(shù)： 2269次

銅綠假單胞菌概況

銅綠假單胞菌，因在代謝過程中產(chǎn)生水溶性的綠色色素，使傷口與創(chuàng)面呈綠色，又名綠膿桿菌，是一種條件致病菌，最適生長(zhǎng)溫度為35℃。該菌對(duì)化學(xué)藥物的抵抗力比一般革蘭氏陰性菌強(qiáng)，且極易產(chǎn)生耐藥性。

因?qū)I(yíng)養(yǎng)要求不高，銅綠假單胞菌廣泛存在于水、土壤、空氣、人和動(dòng)物機(jī)體皮膚及腸道中，對(duì)消毒劑、干燥、紫外線等理化因素及不良環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗力，易形成生物膜，且形成生物被膜后不易被清除。作為條件致病菌，其主要產(chǎn)生胞外酶、內(nèi)毒素、外毒素A等十余種致病因子，可引起化膿性感染、菌血癥、急性腸道疾病和皮膚炎癥等。潮濕的環(huán)境是銅綠假單胞菌存在的重要條件，因此常見有包裝飲用水銅綠假單胞菌不合格信息發(fā)布。一般剛出廠的包裝飲用水中銅綠假單胞菌數(shù)量較少且分布不均，在出廠檢測(cè)時(shí)檢出率較低。但由于包裝飲用水尤其桶裝飲用水產(chǎn)品消費(fèi)周期較長(zhǎng)，該菌在十幾天內(nèi)即可繁殖達(dá)到10000 CFU/mL。這些致病菌可因大量飲水沖淡胃酸而避開人體消化道防御屏障，導(dǎo)致食源性疾病發(fā)生。夏季是包裝飲用水消費(fèi)量最大的季節(jié)，而且氣溫更接近于銅綠假單胞菌的最適生長(zhǎng)溫度，因此該季節(jié)是感染銅綠假單胞菌的高峰期。

銅綠假單胞菌的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)及要求

銅綠假單胞菌檢驗(yàn)原理為根據(jù)其在特定培養(yǎng)基上特定的生長(zhǎng)、形態(tài)和生理生化特征，首先用孔徑為0.45μm的濾膜將250mL水樣中的微生物截留，再將濾膜移至CN瓊脂培養(yǎng)基上在36℃培養(yǎng)24小時(shí)～48小時(shí),使濾膜上的微生物得以生長(zhǎng)；之后結(jié)合菌落的顏色、熒光特性及乙酰胺肉湯、氧化酶等生化試驗(yàn)對(duì)疑似菌落進(jìn)行確認(rèn)，判定是否檢出并計(jì)數(shù)銅綠假單胞菌。我國(guó)現(xiàn)行銅綠假單胞菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)為GB 8538-2022《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》中“57銅綠假單胞菌"。

GB 8538飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法 ——銅綠假單胞菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基試劑列表

貨號(hào)	名稱	類別	規(guī)格	配制量 g/L	單瓶/盒可配制液體量 L
027053	假單胞菌瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基(CN瓊脂)	干粉（瓶）	250g	52.6 g/L	4.75
SR0230	萘啶酮酸(CN瓊脂配套試劑)	生化管（盒）	10支/盒	每支添加于100 mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基中	1.00
027054	假單胞菌瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基(CN瓊脂) 已包含萘啶酮酸產(chǎn)品	干粉（瓶）	250g	52.6 g/L	4.75
029080	甘油（CN瓊脂需添加配套試劑）	生化管（盒）	10支/盒	每支加于100 mL CN瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基中	1.00
CP0420	假單胞菌瓊脂(CN瓊脂)平板	成品（平板）	90 mm×20
027052	金氏B培養(yǎng)基	干粉（瓶）	250g	38 g/L	6.58
029080	甘油（金氏B需添加配套試劑）	生化管（盒）	10支/盒	每支添加于100 mL金氏B基礎(chǔ)培養(yǎng)基中	1.00
022020	營(yíng)養(yǎng)瓊脂	干粉（瓶）	250g	33g/L	7.57
024089	營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板	盒（平板）	90 mm×20
075800	乙酰胺肉湯	生化管（盒）	20支/盒
029229	納氏試劑	檢測(cè)配套試劑（盒）
029170	氧化酶試紙	生化管（盒）	10片/盒

銅綠假單胞菌污染情況分析

近年來(lái)國(guó)家及省級(jí)食品安全監(jiān)管部門公布的數(shù)據(jù)表明，桶裝飲用水的銅綠假單胞菌的不合格率顯著高于一次性使用的瓶裝水。從國(guó)內(nèi)桶裝飲用水生產(chǎn)工藝分析，即源水→初濾→精濾→去離子化→殺菌→灌裝封蓋→燈檢→成品，在生產(chǎn)過程中污染銅綠假單胞菌的主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)有：

（1）源水池保護(hù)不當(dāng)造成微生物負(fù)載過高；

（2）水處理工藝中，蓄水池或管道污染、過濾設(shè)備失效、臭氧消毒不徹di；

（3）操作人員在生產(chǎn)運(yùn)輸過程中不規(guī)范操作；

（4）廠區(qū)外環(huán)境污染風(fēng)險(xiǎn)高，灌裝區(qū)環(huán)境監(jiān)測(cè)缺失、環(huán)境消毒不徹di；

（5）機(jī)器設(shè)備陳舊、清洗消毒工位少、設(shè)備消毒不徹di；

（6）包裝材料儲(chǔ)存環(huán)境不規(guī)范、回收桶清洗消毒不徹di；

（7）長(zhǎng)期使用一種消毒劑、消毒劑配制和使用不規(guī)范、消毒劑濃度監(jiān)控和補(bǔ)充方式不科學(xué)；

（8）產(chǎn)品質(zhì)量把關(guān)能力和關(guān)鍵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)監(jiān)控能力差或缺失，監(jiān)控手段不科學(xué)合理或頻次不足。

桶裝水生產(chǎn)企業(yè)多為中小型生產(chǎn)企業(yè)，其生產(chǎn)過程控制不嚴(yán)格，生產(chǎn)設(shè)備自動(dòng)化程度不高，消毒方式簡(jiǎn)陋、手工程序多，導(dǎo)致作為水體和人體表常見菌的銅綠假單胞菌，污染可能性增大。桶裝水的包裝容器基本都是二次以上回收利用，該清洗環(huán)節(jié)為關(guān)鍵風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)。部分生產(chǎn)企業(yè)沒有專用大桶自動(dòng)刷洗設(shè)備，僅僅靠手工刷洗及灌裝前在灌裝機(jī)上短暫的沖洗來(lái)解決桶內(nèi)壁的污染問題，個(gè)別企業(yè)甚至用皮管手工灌裝，包裝材料消毒工藝消毒不徹di，易造成污染。另外，在運(yùn)輸和存放過程中，因桶口與外部環(huán)境相通，桶中余水易滋生假單胞菌屬等水生微生物，被微生物污染后的回收桶若管理不當(dāng)又會(huì)造成廠區(qū)生產(chǎn)環(huán)境污染，形成惡性循環(huán)。

風(fēng)險(xiǎn)防控建議

消費(fèi)者 購(gòu)買前選擇取得食品生產(chǎn)許可證，信譽(yù)好、正規(guī)品牌的桶裝水生產(chǎn)企業(yè)；購(gòu)買時(shí)檢查桶的材質(zhì)和封口，好的包裝桶由聚碳酸酯（簡(jiǎn)稱PC）制成，桶體透明度高，表面光滑清亮，無(wú)雜質(zhì)、斑點(diǎn)或氣泡，封口熱縮膜較厚，平整有光澤感；購(gòu)買后盡快飲用，盡量在開封后一周內(nèi)用完，并定期對(duì)飲水機(jī)進(jìn)行消毒。

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